Mirus转染试剂TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent,该产品旨在增强载体转染到
贴壁或悬浮的HEK 293细胞的转染效率,并增加重组腺相关病毒或慢病毒的产量。
使用TransIT-VirusGEN®转染试剂转染悬浮或贴壁HEK293细胞可获得最高的转染效率。使用不同的转染试剂将pAAV-hrGFP,pAAV-RC和pAAV-Helper(按照1:1:1比率,1.5μg,Agilent)转染到悬浮Ffeestyle –F细胞(培养于FreeStyleTM F17培养基, A)和贴壁的293T / 17细胞(B)中:TransIT-VirusGEN(2:1, vol:wt),Lipofectamine 2000(3:1),Lipofectamine 3000(3:3:1)和25kDa PEI(4:1)。收获的病毒用于转导HT1080细胞,转导后48h后,使用guava easyCyte TM 5HT流式细胞仪检测GFP的表达。功能性滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算。
使用TransIT-VirusGEN®转染试剂转染悬浮或贴壁HEK293细胞可获得最高的转染效率。使用不同的转染试剂将pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP TM载体和Lentivirus慢病毒混合物(1:1)转染到悬浮Ffeestyle –F细胞(培养于FreeStyleTM F17培养基, A)和贴壁的293T / 17细胞(B)中: TransIT-VirusGEN® (3:1, vol:wt), Lipofectamine® 2000 (2:1 (A)或 3:1 (B)), Lipofectamine® 3000 (2:2:1 (A) 或3:3:1 (B)) 和 25 kDa PEI (4:1)。收集上清液,过滤(0.45μm),使用293T / 17细胞滴定。 使用8μg/ ml TransduceIT TM进行慢病毒转导,导72h后使用guava easyCyte™ 5HT流式细胞仪检测GFP表达情况。
功能性滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算。
TransIT-VirusGEN®转染试剂的强扩展性。使用TransIT-VirusGEN®转染试剂(2:1 (vol:wt), Mirus)
将pAAV-hrGFP,pAAV-RC和pAAV-Helper(按照1:1:1比率,1.5μg/ml,Agilent)转染到悬浮Ffee
style –F细胞(培养于FreeStyleTM F17培养基, A)和贴壁的293T / 17细胞(B)中。收获的病毒用于转导HT1080细胞,转导后48h后,使用guava easyCyte TM 5HT流式细胞仪检测GFP的表达。功能性滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算。
原文出处:【Mirus新品推荐】TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent